产品货号:
WH0078
中文名称:
富含GC模板PCR预混液
英文名称:
2×GC-rich PCR Mix
产品规格:
500μL(不含染料)|500μL(含染料)
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品包含Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可大限度的减少人为误差。适用于保真度较高的PCR反应和结构复杂的模板如GC含量高,有二级结构等的扩增。
本制品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×GC-Rich PCR Mix溶液,加入模板和引物,并加入ddH2O补足体积,使Mix溶液的浓度为1×即可进行反应。
适用范围
- 基因检测:本制品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
- 保真度较高的DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板如GC含量高(60%~75%),有二级结构模板等的扩增:PCR产物如需克隆,纯化后可直接进行T/A载体克隆,如需提高克隆效率,建议加A后再进行T/A载体克隆。
组分 | 500μL(不含染料) | 500μL(含染料) |
2×GC-rich PCR Mix(不含染料) | 500μL | - |
2×GC-rich PCR Mix(含染料) | - | 500μL |
ddH2O | 500μL | 500μL |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。频繁使用时请置于4℃可稳定保存3个月。
0.1U/μl Taq Plus聚合酶,500μM dNTP,20mM Tris-HCl (pH8.3),100mM KCl,3mM MgCl2,稳定剂和增强剂。
经检测无外源核酸酶活性;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温(15~30℃)存放一周,无明显活性改变。
以下举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定优化反应条件。
- 以人基因组DNA为模板,扩增TGF (1915bp,GC 70.4%)的片段,反应体系为25μL(如反应体系不同,可按此比例增加或减少用量)。
成分 用量 模板DNA <1μg Primer 1 (10μM) 0.4μL Primer 2 (10μM) 0.4μL 2×GC-rich PCR Mix 12.5μL ddH2O 至25μL - PCR反应循环的设置:
温度 时间 循环数 94℃ 3min 1 94℃ 30sec 30 50℃ 30sec 72℃ 2min 72℃ 5min 1 - 结果检测:反应结束后取5μL反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
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